液体石蜡(矿物油)覆盖在培养基表面来阻断氧气

液体石蜡(矿物油)覆盖在培养基的表面来阻断氧气供给
     液体石蜡保藏法
　　用液体石蜡(矿物油)覆盖在培养基的表面来阻断氧气供给，不仅可以抑制菌种的物质代谢和延续细胞衰老，同时还能防止培养基的水分蒸发。采用通常的保藏方法至少需1年移植一次，而利用此法可以保藏数年再行移植。、  此法简便易行，不需特殊装置，特别是对那些只生长菌丝不形成孢子的种类，由于不宜利用干燥方法保藏，就显得更为有用。方法是将矿物油在120℃条件下灭菌1小时，再从菌种试管上端注入到菌种管的斜面上，深度高出料面lcm，如果斜面上端未封严而露出时，培养基的水分则会从此蒸发掉，导致培养基变干。应用这种保藏方法为防止棉塞受潮发霉，可采取3种措施：①将试管口外露的棉塞剪去，将熔化的固体石蜡涂于棉塞顶部及管口四周；②用火棉胶或赛璐玢玻璃纸代替石蜡；⑧用绘图纸及橡皮筋严密包扎管口。此种方法对白僵菌、镰孢、轮枝孢等属的种保存lO年后生命力仍然旺盛。为稳妥起见，每隔2—3年应定期检查存活情况。
　　需要恢复菌种生长时，用接种针从矿物油下挑取少许菌丝体移植在斜面上，由于菌丝体外有矿物油，生长缓慢，外观带粘性，一般要再移植一次才能得到良好菌种。
    沙管保藏法　　
　　使用不含有机质(可经浓硫酸处理)的纯沙，经充分水洗干燥后，装入试管干热灭菌，每管装沙量高约lcm。在培养好的菌种中注入无菌水3—5m1，洗下孢子，使成悬浮液，用灭菌吸管取悬浮液滴入沙管中，每小管10滴，拌均匀后把沙管放入干燥器中，以吸水剂干燥后用火焰在棉塞下边烧熔封口，然后置冷暗处保存。