细胞悬浮液中通过测量细胞数目和装满了细胞的体积

  作者:厂家库小编CJK    2020-03-11    阅读:130

细胞悬浮液中通过测量细胞数目和装满了细胞的体积

用培养基中生长的组织和细胞,使由于有机体多细胞状态所产生的一些物理的、生理的和生化的限制作用被降低到最小的程度,因此,这种技术已广泛地应用于发生学、生理学、病理学和药理学的研究之中。从它最根本的意义上说,这种技术可以研究细胞的发育潜能(或全能性),即只要具备恰当的化学和物理的环境,在它的遗传素质的范围内由一种细胞形成任何一种其他细胞类型的能力。虽然动植物的组织和细胞培养的基本原理是相似的,但是,植物组织在较简单的培养基中一般能更好地进行细胞增殖。
    植物的各部分,如根和茎,可以在无菌的条件下把它们切下来,转移到一个能维持它们生长和发育的培养基中进行培养。动物和植物的细胞可以从适当的部位切下,同样把它们转移到一种合适的半固体或液体的培养基中进行培养。已使用的各种培养基都十分复杂,但一般都由含碳的化合物(如糖)、各种无机盐、微量元素、维生素和生长因子等组成。    在这些培养基中经常另外补充一些复杂的营养物,例如动物细胞培养用的血清,植物细胞培养用的椰汁。但是,在可能的情况下最好使用一种完全确定了的培养基,以便可完全重复地制备。细胞在一个适当的培养基中生长j分裂成细胞团.实验工作就可以在这团细胞卜进行。当对通气培养有一个特殊的需要时,正如液体悬浮培养中可能需要的那样,培养物可以在一个锥形瓶或特殊设计的培养瓶中旋转或振荡。如果需要单细胞的悬浮液,要使细胞不聚集往往是很困难的。有时候用酶来处理聚集的细胞,如动物细胞用胰蛋白酶,植物细胞用果胶酶,将能有助于细胞的解聚。
    在细胞悬浮液中通过测量细胞数目和装满了细胞的体积(这二项结合起来可以估价细胞的大小)来测定生长,这要比在整体组织中更容易一些。一种化合物能很直接地加到培养基中而定量的给予细胞,并且能很容易地观察它对细胞生长和代谢过程的影响。这种技术发展到能对去掉了细胞外壁的植物细胞进行培养(原生质体培养),从而进一步扩大了这种技术的潜力。为了维持病毒生长,在培养基中使用动物细胞是这个技术的一个重要的应用。
    当然,细胞培养技术是微生物学家用来培养足够量的藻类、真菌和细菌以便在它们上面进行实验研究的主要手段。固体和液体的介质都可以用作微生物的生长,但是,一般地说,培养基的化学成分不象动物和高等植物细胞培养中那样复杂。微生物的生长速度也比其他细胞培养快得多,因此,要保持植物和动物细胞培养的无菌是比较困难的,因为培养基中任何微生物的感染,将会使微生物在培养基的原点很快的蔓延。    和各种离体技术一样,在把细胞培养的结果延伸到整体状态时就可能会出现问题。对动物和植物细胞培养尤其如此,因为在培养条件下细胞趋向于去分化。

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